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zy2 發表於 2014-12-22 20:08

怎樣診斷生殖器皰疹

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2012-06-14 11:23來源:99健康網


本文導讀:皰疹的診斷需要根據醫學臨床表現和病史及實驗數據而定,下麵介紹幾種診斷生殖器皰疹的方法。

  感染的診斷要依據病史、臨床表現和實驗室檢查結果而定。有不潔性交史,而且在生殖器部位出現皮膚紅斑和原發性水皰,易復發等不難診斷。必要時可作皰液塗片,培養、接種、免疫螢光檢查。血清免疫抗體測定等,均有助於診斷和確定病毒類型。

  一、細胞學方法

  對皮損刮片做Wright-Gemsa (Tzanck試驗)或Papanicolaou染色,可檢出HSV感染特徵的巨細胞包函體,但不能區別HSV感染或水痘 — 帶狀皰疹病毒感染,敏感性僅為病毒分離的60%。

  二、培養法

  從水皰底部取材做組織培養分離病毒,為目前較敏感、最特異的檢查方法,需5-10天,因其技術條件要求高,價格昂貴,不能普遍使用。

  三、抗體檢測

  目前最廣泛的是HSV-2抗體檢測,如蛋白印跡法也可用gD2作抗原檢測HSV-2抗體,具有敏感性,且能區分HSV-1和HSV-2的優點。

  四、基因診斷

  (一)用PCR分型檢測單純皰疹病毒

  PCR是一種敏感性高,特異性強的快速檢測方法,標本中含有1fg HSV-DNA就可以檢出,其在HSV感染的診斷研究中發展較快,且分型檢測HSV是發展的趨勢。

  1、標本採集和處理

  (1)標本採集

  ①腦脊液:直接無菌採取患者0.5ml腦脊液標本於無菌試管送檢。如肉眼可見血色,應離心取上清。

  ②羊水及嬰兒血清: 同上,應避免溶血

  ③腦組織: 腦組織屍檢、活檢標本, 加1ml PBS標本緩衝液研磨後,待檢。

  ④眼及皮膚病灶分泌物:用預測(半幹)棉拭子直接取患處分泌物, 置1ml PBS標本緩衝液中送檢。

  ⑤生殖器(宮頸、陰道、外陰、陰莖)標本:先用消毒棉拭子擦去病變部位表面粘液、污垢,再用預潮棉拭子用力擦拭患處分泌物,置1ml PBS標本緩衝液中送檢。

  (2)標本處理

  ①預處理:所有液體標本均可直接進行範本製備;可以取100μl標本液,離心5000 r/ min×5min後,去上清,取沉澱物進行範本製備。

  ②範本製備:a: 蛋白酶K消化裂解法:沉澱物加100μl蛋白酶K消化裂解液,55℃1 h後,煮沸10 min,離心5000 r/ min×5min,收集上清。 b: 水煮法:沉澱物加100μl蒸餾水,搖均水煮20 min,離心5000 r/ min×5min收集上清。c: 1%Triton X-100裂解法:取採集的標本液100μl,加入1μl Triton X-100,水煮20 min,5000 r/ min×5min,收集上清。d: 5%NP-40裂解法:取採集的標本液100μl,加5μl NP-40,水煮20 min ,5000 r/ min×5min收集上清。e: 如標本溶血嚴重經上述裂解處理後,再加等體積酚-氯仿抽提、冷乙醇沉澱DNA,加10μl DW溶解待檢。
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